非洲豬瘟的試劑盒可以從競(jìng)道廠家買(mǎi)，主要用于疑似病毒等病原感染抗凝血意見征詢、血淸提升、拭子、組織的必然要求、飼料及環(huán)境中的病毒DNA的提取研究成果，純化的核酸可適用于各種常規(guī)操作及PCR試驗(yàn)。

非洲豬瘟的試劑盒

　　核酸DNA提取試劑盒(柱膜法)使用說(shuō)明書(shū)

　　【產(chǎn)品名稱】

　　通用名稱：病毒DNA提取試劑盒

　　英文名稱：Extraction Kit for Virus DNA

　　【預(yù)期用途】

　　本試劑盒主要用于疑似病毒等病原感染抗凝血完善好、血淸大面積、拭子、組織部署安排、飼料及環(huán)境中的病毒DNA的提取搖籃，純化的核酸可適用于各種常規(guī)操作及PCR試驗(yàn)。

　　【試劑盒組分】

　　I推廣開來、試劑盒組成及貯藏條件

　　2、 保存條件及有效期：室溫下保存大力發展，有效期12個(gè)月.

　　3豐富內涵、 需自備材料：無(wú)水乙醇、1.5 mL無(wú)菌離心管產能提升、1.5 mL無(wú)菌離心管(長(zhǎng)臂型)適應性、生理鹽水、研缽充分發揮、無(wú)菌

　　1mL, 2OOuL發展成就、10uL槍頭、記號(hào)筆等。

　　【操作步驟】

　　一開展面對面、樣品制備

　　1系統、 血液樣品：抗凝血樣品置離心管中，8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘進一步提升，取上層血漿;非抗凝血樣品置離心 管中空間廣闊，待凝固后，8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘改革創新，取上層血清知識和技能，置于滅菌離心管中，編號(hào)待檢高效利用。

　　2特征更加明顯、 組織樣品：采集脾臟估算、肝臟講理論、淋巴結(jié)、扁桃體等病變組織樣品0.1g.組織勻漿器或研缽中充分勻漿或研磨不要畏懼，加入1 mL生理鹽水混勻服務為一體，8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上清于滅菌離心骨中逐漸顯現，編號(hào)待檢全會精神。

　　3、 口腔液：進(jìn)食前用拭子/口腔液采集袋或自制棉線綁紗布團(tuán)吸引動(dòng)物咀嚼拓展基地，收集口腔液大于 500uL集中展示， 8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上清于滅菌離心管中體系流動性，編號(hào)待檢探索創新。

　　4、 飼料：取適量研磨后的飼料(約0.2g)實現了超越，放入含1 mL生理鹽水或PBS(PH為7.4)緩沖液的2 mL EP 管屮新產品，振蕩混勻，8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘橋梁作用，取上清于滅菌離心管中,編號(hào)待檢.

　　5新品技、 灰塵：用無(wú)菌棉簽蘸取適量環(huán)境表面上的灰塵，放入含1 mL生理鹽水或PBS(PH為7.4)緩沖液的2 mL EP管中求得平衡，振蕩混勻紮實做，8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上清于滅菌離心管中至關重要，編號(hào)待檢提供深度撮合服務。

　　二、DNA的提取

　　1、取裂解液200uL加入無(wú)核酸酶1.5 mL離心曾屮事關全面，分別加入血漿/血清/組織液等樣品液200uL. 震蕩混勻10秒或顛倒混勻10次表現明顯更佳，室溫放置5分鐘(如果室內(nèi)溫度較低時(shí).需放置25C水浴溫育)，再加入200uL無(wú)水乙醇技術節能，顛倒混勻10秒;若樣品渾濁則先12000轉(zhuǎn)/分鐘離心1分鐘處理指導，取上清液，以避免堵塞柱子;

　　2國際要求、 將液體轉(zhuǎn)入套有收集管的吸附柱中流動性， 12000rpm離心1分鐘：

　　3、 棄收集管液體競爭激烈，向吸附柱中加600uL洗液I , 12000 rpm離心1分鐘;

　　4持續創新、 棄收集管液體，向吸附柱中加600uL洗液II空白區， 12000 rpm離心I分鐘;

　　5協調機製、 棄收集管液體，12000 rpm離心2分鐘形勢，以*去除殘留洗液;

　　6實踐者、將吸附柱轉(zhuǎn)入新的無(wú)核酸酸1.5mLEP管(長(zhǎng)臂型)中，向柱中央滴加50 uL洗脫液約定管轄，靜置1分鐘, 12000 rpm離心1分鐘數據，EP管中液體即為病毒DNA。

　　【注意事項(xiàng)】

　　1發揮、 實(shí)驗(yàn)前諾仔細(xì)閱讀本試劑盒說(shuō)明書(shū)顯著，嚴(yán)格按照操作步驟執(zhí)行.在操作過(guò)程中對(duì)時(shí)間、試劑體積等 粘確控制可以獲得好的結(jié)果開放以來。

　　2, 樣本應(yīng)新鮮采集使用占，或低溫運(yùn)輸儲(chǔ)存;

　　3, 樣本具有潛在感染風(fēng)險(xiǎn)，核酸的提取應(yīng)在核酸提取實(shí)驗(yàn)室的生物安全柜中進(jìn)行實施體系。

　　4組建、 核酸提取冇關(guān)耗材確保高溫滅菌，提取后核酸盡快進(jìn)入下一步試驗(yàn)或冷凍保存待用效果較好。

　　5, 試劑使用前應(yīng)混合均勻重要的意義，試劑具有一定腐蝕性，使用時(shí)請(qǐng)戴手套等多個領域、口zhao做好防護(hù)再獲。

　　6. 低溫下裂解液出現(xiàn)結(jié)晶數(shù)屬正常現(xiàn)象應用擴展，可在60°C水浴加熱助溶后使用體驗區。

　　7、 實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的廢棄物應(yīng)及時(shí)收集，遠(yuǎn)離PCR實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行無(wú)害化處理有望。

　　僅供獸醫(yī)診斷使用

　　非洲豬瘟病毒熒光PCR核酸檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

　　【獸藥名稱】

　　通用名稱：非洲豬瘟病毒熒光PCR核酸檢測(cè)試劑盒

　　漢語(yǔ)拼音:Feizliouzhuwen Bingdu Yingguang PCR Hesuan Jianceshijihe

　　英文名稱：African swine Fever Virus (ASFV) PCR Nucleic Acid Diagnostic Kit

　　商品名稱：無(wú)

　　【主要成分與含量】試劑盒中含有如下組分:

　　【用法與判定】

　　1 用法

　　1.1待檢樣品釆集可靠保障、保存及運(yùn)輸

　　1.1.1樣品釆集

　　(1) 活豬樣品 無(wú)菌采集抗凝血或血清5mL

　　(2) 病死豬剖檢樣品或屠宰場(chǎng)剖檢樣品 無(wú)菌采集死豬的牌自然條件、肺、腎開展、扁桃體互動互補、淋巴結(jié)、肌肉等組織樣品發展成就。2?8°C低溫運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室用于檢測(cè)成就。

　　(3) 病豬污染的周邊環(huán)境 采集與病豬相關(guān)場(chǎng)所的糞便重要方式、飼料開展面對面、污水樣品。2?8°C低溫運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室用于檢測(cè)非常重要。

　　1.1.2樣品保存 采集的樣品在2?8°C保存應(yīng)不超過(guò)24小時(shí)進一步提升，-70°C條件下保存，避免反復(fù)凍 融認為。

　　1.1.3樣品運(yùn)輸泡沫箱加冰袋后密封進(jìn)行運(yùn)輸系統。包裝和運(yùn)輸應(yīng)符合農(nóng)業(yè)農(nóng)村部《高致病性動(dòng) 物病原微生物菌(毒)種或者樣品運(yùn)輸包裝規(guī)范》和交通運(yùn)輸部門(mén)關(guān)于危險(xiǎn)品運(yùn)輸管理的有關(guān)規(guī)定。

　　1.2樣品處理

　　1.2.1血液樣品處理 抗凝血樣品置于離心管中重要意義，8000 r/min離心2分鐘取上層血漿交流等，編號(hào)待 檢。非抗凝血樣品置于離心管中規劃，待凝固后提高，8000 r/min離心2分鐘取200μL上層血清，編號(hào)待檢進入當下。

　　1.2.2組織樣品處理取適量脾臟紮實、肝臟、淋巴結(jié)新體系、扁桃體投入力度、肌肉等組織，置于研磨器或研磨管中研磨，再加適量生理鹽水混勻貢獻法治，制成約10%的組織勻漿設備製造，8000 r/min離心2分鐘，取200μL上 清于RNase/DNase-free無(wú)菌離心管中攻堅克難，編號(hào)備用信息化。

　　1.2.3環(huán)境樣品處理

　　1.2.3.1糞便、飼料樣品處理方法取適量的糞便生動、飼料放入盛有PBS緩沖液的研磨管中研磨混勻新型儲能，制成約10%的勻漿液.8000 r/min離心2分鐘，取200μL上清于RNase/DNase-free無(wú)菌離心 管中新品技，編號(hào)備用範圍。

　　1.2.3.2污水樣品處理方法 直接取200μL污水進(jìn)行核酸提取。

　　1.3病毒核酸的提取用磁珠法或柱式法進(jìn)行DNA核酸提取紮實做。

　　1.4熒光PCR反應(yīng)：

　　1.4.1從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液空間廣闊、酶混合液，室溫融化后提供深度撮合服務，2000 r/min離心5秒服務品質。設(shè)被 檢樣品、陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照總和為n,則反應(yīng)體系配制如下：

　　試劑 體系

　　PCR 反應(yīng)液 17× (n+1) μL

　　酶混合液 3× (n+1) μL

　　1.4.2在新的RNase/DNase-fire 1.5 ml離心管中加入上述試劑組成部分，充分混勻后瞬時(shí)離心集成。按照20μL/ 管分裝量將試劑分裝至熒光PCR反應(yīng)管。

　　1.4.3在上述制備好的熒光PCR反應(yīng)管中分別加入陰性對(duì)照互動講、陽(yáng)性對(duì)照各5μL穩定性、處理好的待測(cè)核酸各5μL,終體積25μL/管，蓋好熒光PCR反應(yīng)管蓋過程中，混勻后瞬時(shí)離心去突破，轉(zhuǎn)移到熒光PCR儀器 上。

　　144將PCR反應(yīng)管放置在熒光PCR儀樣品槽中達到，在熒光PCR儀上運(yùn)行以下程序：

　　熒光通道選擇FAM,在PCR擴(kuò)增階段每個(gè)循環(huán)的55℃時(shí)采集熒光信號(hào)智能設備。設(shè)置擴(kuò)增體系為25μL, 同時(shí)要選擇passive reference和quencher為none的模式。(注：若熒光PCR儀(如AB17500)按說(shuō)明 書(shū)中的反應(yīng)程序設(shè)置后因持溫時(shí)間短無(wú)法運(yùn)行蓬勃發展，可將預(yù)擴(kuò)增和PCR擴(kuò)增條件變更為95C： 5秒 55°C： 30 秒)

　　2結(jié)果判定

　　2.1試驗(yàn)有效性判定

　　陽(yáng)性對(duì)照有典型擴(kuò)增曲線且Ct值≤30.且陰性對(duì)照無(wú)Cl值或無(wú)擴(kuò)增曲線特點，線形為直線或輕微斜線，無(wú)指數(shù)增開放要求。則判試驗(yàn)結(jié)果有效向好態勢。否則，此次試驗(yàn)視為無(wú)效服務機製。

　　2.2樣品判定

　　2.2.1陽(yáng)性：樣本檢測(cè)結(jié)果Ct值≤35且有明顯指數(shù)增貢獻力量，判定檢出非洲豬瘟病毒核酸使用。

　　2.2.2可疑：樣本檢測(cè)結(jié)果Ct值在35?38范圍內(nèi)。此時(shí)應(yīng)對(duì)樣本進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)發行速度，如果重復(fù)實(shí)驗(yàn) 結(jié)果Ct值仍在35?38范圍內(nèi)更加堅強，有明顯指數(shù)增.則判定為陽(yáng)性，否則為陰性性能。

　　2.2.3陰性：樣本檢測(cè)結(jié)果Ct值>38或無(wú)Ct值初步建立，判定未檢出非洲豬瘟病毒核酸。

　　【注意事項(xiàng)】(1)實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本試劑盒說(shuō)明書(shū)供給，嚴(yán)格按照操作步驟執(zhí)行的方法，在操作過(guò) 程中對(duì)時(shí)間、試劑體積等控制可以獲得好的結(jié)果進行探討。

　　(2) 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)嚴(yán)格按照有關(guān)規(guī)定分區(qū)管理落到實處，依照配液區(qū)-模板提取區(qū)-擴(kuò)增區(qū)-分析區(qū)順序 進(jìn)行基因檢測(cè)。各區(qū)間人員最新、器材技術創新、試劑及空氣流向應(yīng)有嚴(yán)格要求。

　　(3) 核酸提取有關(guān)耗村確保潔凈製造業、無(wú)DNase/RNase,提取過(guò)程盡量低溫優化服務策略、快速，完成后進(jìn)入 下一步實(shí)驗(yàn)或凍保發展基礎。

　　(4) 對(duì)于頂部采光儀器要帶新的一次性PE手套對(duì)熒光PCR管封蓋兩個角度入手，對(duì)于底部采光儀

　　器要避免徒手或使用過(guò)的手套接觸熒光PCR管底，檢測(cè)過(guò)程中使用不帶熒光物質(zhì)一次性乳膠手套顯示。

　　(5) 凍存試劑使用前應(yīng)于室溫下*融化創新為先，瞬時(shí)離心使液體*沉于管底。避免反復(fù)凍融科普活動， 以免影響試劑性能。

　　(6) 樣品強化意識、陽(yáng)性對(duì)照等在使用后及時(shí)封蓋長期間，.避免組分間及氣溶膠等的污染造成假陽(yáng)性。

　　(7) 擴(kuò)增產(chǎn)物禁止開(kāi)蓋現場，實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的廢棄物應(yīng)及時(shí)收集高端化，遠(yuǎn)離PCR實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行無(wú)害化處理。

　　【規(guī)格】50頭份/盒

　　【貯藏與有效期】試劑盒置-20°C以下避光保存我有所應，有效期12個(gè)月提單產。

　　【批準(zhǔn)文號(hào)】獸藥生字163668871