根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)是否附著在支持介質(zhì)上解決問題，分為貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞。

貼壁細(xì)胞天生容易貼壁，這為后續(xù)實(shí)驗(yàn)提供了便利條件。

但是懸浮細(xì)胞在培養(yǎng)基中懸浮生長(zhǎng)，如何像貼壁細(xì)胞一樣好操作新創新即將到來，一直是大家的夢(mèng)想。

一 傳統(tǒng)的方法：細(xì)胞準(zhǔn)備與固定

（1）單層生長(zhǎng)細(xì)胞：取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)細(xì)胞，用0.25％胰蛋白酶消化相互融合，制成單細(xì)胞懸液首要任務。將細(xì)胞接種到預(yù)先放置幾張6×22mm蓋玻片的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)1-3天不同需求，待細(xì)胞接近長(zhǎng)成單層發展，取出蓋玻片，進(jìn)入PBS（0.01 mol/L,pH7.4）洗2次總之，然后根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康拿嫦?，選擇適當(dāng)固定劑固定細(xì)胞。常用固定劑有：95％乙醇（固定時(shí)間10-30min）研學體驗，丙酮（5－10min）等建設項目。

（2) 懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞：取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)細(xì)胞，用PBS離心洗滌（1000rpm近年來，5min）2次講道理，或用細(xì)胞離心甩片機(jī)制備細(xì)胞片或直接制備細(xì)胞涂片，把細(xì)胞片浸入95％乙醇或丙酮中固定技術先進。

2 將已經(jīng)固定的細(xì)胞玻片放入蓋片染色缸更多的合作機會，用PBS振洗5min，取出吹干認為。

3 滴加適當(dāng)稀釋的特異性抗體服務好，置于濕盒內(nèi)，37度保溫30－60min或度冰箱過夜

4 PBS振洗3次反應能力，每次5min共謀發展，吹干。

5 滴加適當(dāng)稀釋的熒光素標(biāo)記抗體結構重塑，置于濕盒內(nèi)聽得懂，37度保溫30－60min。

6 PBS振洗2次大大縮短，每次5min要落實好，然后用蒸餾水振洗1次。

7 50％緩沖甘油封片更默契了。

二 Shi-Fix玻片最新方法

Shi-Fix玻片先進技術，可以讓我們像貼壁細(xì)胞一樣對(duì)懸浮細(xì)胞做免疫熒光，如下是使用Shi-Fix做的實(shí)驗(yàn)結(jié)果不合理波動。簡(jiǎn)單的四部宣講手段，告別傳統(tǒng)的自己涂片，自己甩片積極拓展新的領域，自己烤片等作坊式方法配套設備。